一、B細(xì)胞的背景
B淋巴細(xì)胞簡稱B細(xì)胞，是由骨髓中的造血干細(xì)胞分化發(fā)育而來。與T淋巴細(xì)胞相比，它的體積略大。B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，會(huì)增殖分化出大量漿細(xì)胞。漿細(xì)胞可合成和分泌抗體并在血液中循環(huán)。大部分發(fā)揮效應(yīng)功能的B細(xì)胞在體內(nèi)存活的時(shí)間較短，僅數(shù)天至數(shù)周，但其記憶細(xì)胞在體內(nèi)可長期存在1。
B細(xì)胞也是一異質(zhì)性群體，顯示不同的功能和表面標(biāo)志。CD5表達(dá)與否，將B細(xì)胞分為B1和B2兩個(gè)亞群。B1細(xì)胞為CD5+B細(xì)胞，主要識(shí)別非蛋白質(zhì)抗原，屬于固有類淋巴細(xì)胞，B2即通常指的B細(xì)胞，為CD5-B細(xì)胞，主要識(shí)別蛋白質(zhì)抗原。在Th細(xì)胞的輔助下，B2細(xì)胞才能被完全激活并介導(dǎo)對(duì)T細(xì)胞依賴抗原的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生特異性抗體。B2細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答特點(diǎn)為：可發(fā)生體細(xì)胞突變，有親和力成熟，產(chǎn)生高親和力抗體，可產(chǎn)生免疫記憶細(xì)胞1。
二、B細(xì)胞的功能
1. 產(chǎn)生抗體介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答
◆中和作用：針對(duì)病毒、胞內(nèi)寄生菌、細(xì)菌外毒素。
◆調(diào)理作用：針對(duì)胞外復(fù)制的細(xì)菌。
◆參與補(bǔ)體的溶細(xì)胞或溶菌作用。
◆抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（ADCC）：針對(duì)病毒感染細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞。
2. 提呈可溶性抗原
B細(xì)胞是一類抗原提呈細(xì)胞，活化后其表面BCR結(jié)合可溶性抗原，通過內(nèi)吞和加工后，以抗原肽-MHC Ⅱ類分子復(fù)合物形式提呈給CD4+T細(xì)胞。
3. 參與免疫調(diào)節(jié)
激活的B細(xì)胞產(chǎn)生大量細(xì)胞因子、參與免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)及造血。
三、B細(xì)胞的分化和成熟
哺乳類動(dòng)物B細(xì)胞的分化和成熟主要分為祖B細(xì)胞、前B細(xì)胞、不成熟B細(xì)胞、B細(xì)胞的成熟（過渡B細(xì)胞到成熟B細(xì)胞）、活化B細(xì)胞和漿細(xì)胞幾個(gè)階段2。其中祖B細(xì)胞、前B細(xì)胞和不成熟B細(xì)胞的分化是抗原非依賴的，其分化過程在骨髓中進(jìn)行。抗原依賴階段是指成熟B細(xì)胞在抗原刺激后活化，并繼續(xù)分化為合成和分泌抗體的漿細(xì)胞，這個(gè)階段的分化主要是在外周免疫器官中進(jìn)行的。
祖B細(xì)胞（pro-B cell）
這種發(fā)育早期的B細(xì)胞，發(fā)生在人胚胎約第9周開始，小鼠約第14天開始。尚未表達(dá)B細(xì)胞系的特異表面標(biāo)志，也未發(fā)生lg基因重排，仍處于胚系基因（germline）階段。但祖B細(xì)胞的晚期可出現(xiàn)B系特異標(biāo)志，Thy-1 、Tdt 、B200 、mb-1 等分子。
前B細(xì)胞（pre-B cell）
是前B細(xì)胞是在骨髓中由祖B細(xì)胞分化而來，只存在于骨髓和胎肝等造血組織，約占成人骨髓有核細(xì)胞的5%。前B細(xì)胞胞漿中可檢測(cè)到IgM的重鏈μ鏈，但無輕鏈，也無膜表面Ig的表達(dá)，因此缺乏對(duì)抗原的反應(yīng)能力。末端脫氧核甘酸轉(zhuǎn)移酶（terminal deoxy nucleotidyl transferase，TdT）以及共同型急性淋巴母細(xì)胞白血病抗原（common acute lymphoblastic leukaemia antigen，CALLA，即CD10）可表達(dá)在前B細(xì)胞，進(jìn)入非成熟B細(xì)胞后這兩種標(biāo)志即消失，因此TdT和CD10對(duì)于區(qū)分前B細(xì)胞與B細(xì)胞其它發(fā)育階段非常有用。此階段還表達(dá)MHCⅡ、CD19、CD20和CD24等分化抗原。其中CD19、CD20、和CD22在胞漿中的出現(xiàn)均早于μ鏈。前B細(xì)胞對(duì)抗原無應(yīng)答能力，不表現(xiàn)免疫功能。
不成熟B細(xì)胞（immature B cell）
此階段發(fā)生輕鏈基因重排，故可組成完整的IgM分子，并表達(dá)于膜表面（IgM），可稱為Bμ細(xì)胞。此種細(xì)胞如與抗原結(jié)合，易使膜受體交聯(lián)，產(chǎn)生負(fù)信號(hào)，使B細(xì)胞處于受抑狀態(tài)，不能繼續(xù)分化為成熟B細(xì)胞。這種作用可能是使自身反應(yīng)B細(xì)胞克隆發(fā)生流產(chǎn)，是形成B細(xì)胞自身耐受的機(jī)制之一。不成熟B細(xì)胞開始喪失Tdt和CD10，但可表達(dá)CD22、CD21及FcR。同時(shí)CD19、CD20以及MHCⅡ類分子表達(dá)量增加。
圖1：早期B細(xì)胞的分化過程及主要標(biāo)志
CLPs, common lymphoid progenitors; BM, bone marrow; RAG, recombinase activating genes; TdT, terminal deoxynucleotidyl transferase; SLC, surrogate light chain; BCR, B cell receptor
B細(xì)胞的成熟
未成熟的B細(xì)胞將在幾天內(nèi)離開骨髓，并進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)作為過渡B細(xì)胞（transitional B cells）。根據(jù)細(xì)胞表面標(biāo)記的表達(dá)和功能，將過渡B細(xì)胞細(xì)分為3組：T1、T2和T3 B細(xì)胞3。這些細(xì)胞可以在血液和次級(jí)淋巴器官中發(fā)現(xiàn)，但很少進(jìn)入淋巴管。這些過渡細(xì)胞代表分化為更成熟的前免疫B細(xì)胞群之前的最后階段，分別為濾泡(follic-lar，F(xiàn)O) B細(xì)胞、邊緣區(qū)(marginal zone，MZ) B細(xì)胞、生發(fā)中心(germinal center，GC) B細(xì)胞和記憶性（memory）B細(xì)胞。過渡B細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒霣細(xì)胞亞群的機(jī)制沒有完全研究清楚，細(xì)胞因子的可用性、BCR特異性和與預(yù)先存在的成熟B細(xì)胞的競爭都發(fā)揮了作用4。
過渡B細(xì)胞成熟主要發(fā)生在脾臟中，T1 B細(xì)胞通過BAFF家族的配體和受體介導(dǎo)的信號(hào)刺激，而成熟為T2 B細(xì)胞。T1 B細(xì)胞存在于脾髓和毛囊外的外周動(dòng)脈淋巴管套(PALS)，T2B細(xì)胞存在于濾泡5。在脾臟中也發(fā)生基于抗原的過渡B細(xì)胞的選擇，以確保那些對(duì)自身抗原具有低親合力的成熟B細(xì)胞的存活，以及清除那些對(duì)自身抗原具有高親和力的成熟B細(xì)胞。然后，T2 B細(xì)胞分化成能夠進(jìn)入生發(fā)中心的循環(huán)B細(xì)胞或填充于邊緣區(qū)的非循環(huán)B細(xì)胞。生發(fā)中心中的B細(xì)胞成熟與抗體V區(qū)基因的體細(xì)胞超突變相關(guān)，這提供了產(chǎn)生對(duì)抗原具有高親和力的抗體的基礎(chǔ)2。離開生發(fā)中心的抗原選擇的B細(xì)胞變?yōu)橛洃浶訠細(xì)胞或漿母細(xì)胞（plasmablasts）。
表2 人和小鼠的外周B細(xì)胞亞群的表面標(biāo)記、相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子和定位
TACI, transmembrane activator and cyclophilin ligand interactor; BCMA, B cell maturation antigen; BR3, B lymphocyte stimulator receptor 3; Ig, immunoglobulin.
活化B細(xì)胞（activated B cell）
成熟B細(xì)胞被相應(yīng)抗原或多克隆刺激劑刺激后成為活化B細(xì)胞，繼而發(fā)生增殖和分化，在此過程中，膜結(jié)合Ig水平逐漸降低，而分泌型Ig逐漸增加，并可發(fā)生免疫球蛋白基因重鏈類別的轉(zhuǎn)換?；罨疊細(xì)胞中的一部分可分化為小淋巴細(xì)胞，停止增殖和分化，并可存活數(shù)月至數(shù)年，當(dāng)再次與同一抗原接觸時(shí)，很快發(fā)生活化和分化，產(chǎn)生抗體的潛伏期短，抗體水平高，維持時(shí)間長，這種B細(xì)胞稱為記憶B細(xì)胞（memory B cell）。
漿細(xì)胞（plasma cell，PC）
又稱抗體分泌細(xì)胞（antibody secreting cell）。成熟B細(xì)胞接受抗原刺激后，在抗原提呈細(xì)胞和Th細(xì)胞的輔助下成為活化B細(xì)胞，進(jìn)而分化為漿細(xì)胞。當(dāng)成熟B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞時(shí)，B細(xì)胞表面的部分標(biāo)志消失，并出現(xiàn)一些新的漿細(xì)胞特有標(biāo)志，如漿細(xì)胞抗原-1（PCA-1）等分子，而mIg, MHCⅡ類抗原、CD19、CD20、CD21、CD22等標(biāo)記消失。并可發(fā)生Ig的類別轉(zhuǎn)換，從產(chǎn)生IgM轉(zhuǎn)換為產(chǎn)生IgG 、IgA或IgE的B細(xì)胞。
四、常見B細(xì)胞的表面標(biāo)志及Bioss產(chǎn)品
參考文獻(xiàn)
1.LeBien TW and Tedder TF (2008). Blood 112, 1570-1580.
2.Tobòn GJ et al. (2013). Autoimmune Dis 2013, 827254.
3.Palanichamy A et al. (2009). J Immunol 182, 5982-5993.
4.Naradikian MS et al. (2014). (Springer Basel), pp. 11-35.
5.Chung JB et al. (2002). International Immunology 14, 157-166.
